Vẫn còn rất nhiều người lạ lẫn với thuật ngữ ADN tái tổng hợp, mục tiêu cũng như những phương pháp tạo nên chúng. Để trả lời những thắc mắc này cho những bạn, sau đây chúng tôi sẽ gửi tới những bạn nội dung bài viết ADN tái tổng hợp là gì? Cùng với đó là mục tiêu và những phương pháp phổ thông để tạo nên ADN tái tổng hợp.

Bạn Đang Xem: ADN tái tổ hợp là gì? Các phương pháp tạo nên ADN tái tổ hợp

ADN tái tổng hợp là gì?

ADN tái tổng hợp là những phân tử ADN được tạo thành từ 2 hoặc nhiều ADN của nhiều loài sinh vật khác nhau. ADN tái tổng hợp được tạo nên nhờ việc tiến bộ của khoa học kỹ thuật và có nhiều ứng dụng trong cuộc sống. Hiện nay, với sự phát triển không ngừng nghỉ về khoa học, phương pháp tạo nên ADN tổng hợp cũng dễ dàng hơn và cũng đều có nhiều người nghe biết ADN tái tổng hợp là gì.

Đọc Thêm: Bảng Giá xét nghiệm ADN ngày nay.

Mục tiêu để tạo nên ADN tái tổng hợp

Bên cạnh vướng mắc ADN tái tổng hợp là gì? Rất nhiều người còn không biết mục tiêu tạo nên những ADN này. Sau đây chúng tôi sẽ trả lời những thắc mắc này cho những bạn. Với mục tiêu thực hiện quá trình sự tách dòng, ADN tái tổng hợp được những nhà khoa học tạo ra. Vậy quá trình tách dòng là gì?

Xem Thêm : Ủy viên bộ chính trị là gì? [2023]

Tách dòng là quá trình các ADN tác lập và thu thập nhiều bản sao đồng nhất của một gen hoặc một đoạn ADN. Tách dòng có thể đi kèm hoặc không với sự biểu hiện của nhiều Protein trong ADN. Quá trình này giúp tạo nên ADN tái tổng hợp và thiết lập nên nhà băng bộ gen, cDNA,…

ADN tái tổng hợp là gì? Các yêu cầu của ADN tái tổng hợp

Như các bạn đã biết, ADN tái tổng hợp là những ADN mới được tổng hợp, điều này tạo nên sự đa dạng cho nhà băng bộ gen. Vậy những yêu cầu của ADN tái tổng hợp là gì?

• ADN tái tổng hợp phải đáp ứng được những yêu cầu của một vector chuyển đối gen thông thường.
• ADN tái tổng hợp cần sở hữu hoạt tính khi được đưa vào tế bào chủ của nó.
• ADN tái tổng hợp cần có những tín hiệu có thể nhận diện trong quần thể, dễ dàng quan sát sự hoạt động và biểu hiện.

Các phương pháp phổ thông tạo nên ADN tái tổng hợp hiện nay

Nhằm giúp giúp nhà băng bộ gen thêm phong phú. Hiện nay, ADN tái tổng hợp được tạo nên ngày càng nhiều. Sau đây các bạn hãy cùng tìm hiểu những phương pháp thường được dùng làm tạo nên ADN tái tổng hợp.

Phương pháp dùng đầu lệch để tạo ADN tái tổng hợp

Đây là phương pháp tạo nên ADN tái tổng hợp đơn giản và được sử dụng phổ thông nhất. Các bước thực hiện phương pháp này gồm có:

• Chọn và xử lý ADN plasmid là bước trước tiên. Lúc này các Plasmid được tách từ E.Coli hoặc tế bào nấm lên men theo phương pháp chiết tách ADN phổ thông. Sau đó, các enzyme RE II sẽ tiến hành cắt và chừa ra đầu hở sở hữu 2 đầu lệch nhau.
• Tiếp Từ đó những ADN đoạn cài sẽ tiến hành lựa chọn và thu thấp rồi đem đi tinh luyện theo mục tiêu riêng tùy theo nghiên cứu. Lúc này, các ADN sẽ tiến hành căn bằng cùng một loại enzyme để tạo ra những vết cắt tương tự.
• Cuối cùng, các ADN sẽ tiến hành ghép lại với nhau bằng phương pháp ủ ADN đoạn cài với Plasmid cùng với sự xúc tác của enzim ADN ligase. Cuối cùng tất cả chúng ta sẽ thu được ADN tái tổng hợp.

Phương pháp sử dụng đoạn nối để tạo nên ADN tái tổng hợp

Tương tự như phương pháp sử dụng đầu lệch, phương pháp này cũng sử dụng cách chọn và xử lý vector plasmid như trên. Sau đó là bước lựa chọn và tiến hành xử lý đoạn cài.

Xem Thêm : Gia sư là gì? Nghề gia sư là làm gì?

Các linker là những đoạn ADN có kích thước từ 10 đến 15 nucleotide được tổng hợp từ các phương pháp hóa học. Điểm nhất là giữa các đoạn linker này phải có trình tự nhận diện được thiết lập bởi một enzyme cắt hạn chế loại II.

Các cDNA được tổng hợp từ mRNA sẽ tiến hành enzyme sao chép trái lại theo cơ chế nuclease S1. Sau đó, phân tử lai sẽ tiến hành tạo nên từ việc ủ các đoạn nối linker có chứa chuỗi đích cùng với cDNA và enzyme AND ligase. Các ADN sau lúc được lai tạo sẽ tiến hành cắt bởi EcoRI và nhằm tạo ra phân tử có 2 đầu lệch.

Cuối cùng là bước tạo nên vector tái tổng hợp bằng phương pháp ghép đầu phân tử ADN lai vào Plasmid. Nhờ tác dụng của ADN ligase mà ADN tái tổng hợp được hình thành.

Phương pháp tạo ADN tái tổng hợp bằng phương pháp sử dụng Enzyme terminal transferase (ETT)

Đây là phương pháp tạo nên ADN tái tổng hợp trên nguyên tắc dựa vào đặc tính đặc biệt quan trọng của ETT là có khả năng gắn được cùng một loại nucleotide vào đầu OH của ADN. Để tạo nên ADN bằng phương pháp này cần thực hiện các bước sau đây.

• Trước nhất cần lựa chọn và phân lập các ADN đầu bằng và các plasmid. Sau đó cắt chúng bằng enzyme BamHI và để hở hai đầu dính.
• Sau đó, ủ ADN này với một loại nucleotide là dCTP cùng với ETT để tạo nên polyC tại đầu OH của ADN lạ. Điều này cũng được thực hiện tương tự trên plasmid.
• Đưa ADN lạ vào trong plasmid cùng chất xúc tác là enzyme AND ligase. Các đầu này còn có trình tự bổ sung sẽ tự động hóa liên kết và bắt cặp với nhau.
• Cuối cùng bổ sung thêm enzyme DNA – polymerase theo nguyên tắc bổ sung để tạo nên một ADN tái tổng hợp hoàn chỉnh.

Vậy là Trung Tâm ADN NOVAGEN đã vừa mang tới những thông tin hữu ích để giúp các bạn nắm rõ hơn ADN tái tổng hợp là gì. Không những thế là mục tiêu và những phương pháp phổ thông để tạo nên ADN tái tổng hợp hiện nay.